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深圳市芬析儀器制造有限公司
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非洲豬瘟病毒檢驗儀檢測方法及步驟

發表時間:2019-05-08

非洲豬瘟病毒檢驗儀檢測方法及步驟:CSY-E96D非洲豬瘟病毒檢驗儀可快速畜牧類疾病診斷如非洲豬瘟、禽流感、豬瘟、豬藍耳、偽狂犬等疾病。


實驗所需自備試驗器材:

1.非洲豬瘟病毒檢驗儀檢測儀(450nm)

2.高精度加樣器及槍頭:0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL

3.37℃恒溫箱或水浴鍋

4.蒸餾水或去離子水


非洲豬瘟病毒檢驗儀樣本處理及要求:

1. 血清:室溫血液自然凝固10-20分鐘,離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清,保存過程中如出現沉淀,應再次離心。

2. 血漿:應根據標本的要求選擇EDTA或檸檬酸鈉作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清,保存過程中如有沉淀形成,應該再次離心。

3. 尿液:用無菌管收集,離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清,保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。胸腹水、腦脊液參照實行。

5. 組織標本:切割標本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存備用。標本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),用手工或勻漿器將標本勻漿充分。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。分裝后一份待檢測,其余冷凍備用。

6.標本采集后盡早進行提取,提取按相關文獻進行,提取后應盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗,可將標本放于-20℃保存,但應避免反復凍融.

7.不能檢測含NaN3的樣品,因NaN3抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。


非洲豬瘟病毒檢驗儀操作步驟:

1.從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條,剩余板條用自封袋密封放回4℃。

2.設置陰、陽性對照孔和樣本孔,陰、陽性對照孔中加入陰性對照、陽性對照各50μL;

3.待測樣本孔加待測樣本10μL,樣本稀釋液40μL;

4.隨后陰、陽性對照孔和樣本孔中每孔加入非洲豬瘟病毒檢驗儀辣根過氧化物酶(HRP)標記的檢測抗原100μL,用封板膜封住反應孔,37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。

5.棄去液體,吸水紙上拍干,每孔加滿洗滌液,靜置1min,甩去洗滌液,吸水紙上拍干,如此重復洗板5次(也可用洗板機洗板)。

6.每孔加入底物A、B各50μL,37℃避光水浴鍋孵育15min。

7.每孔加入終止液50μL,15min內,在非洲豬瘟病毒檢驗儀450nm波長處測定各孔的OD值。

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